출처(다카라 코리아 바이오 메디컬(takara.co.kr)기초를 다진 1석사 1년차입니다. 생명 공학 쪽에서 공부하는 중이고 지금 정리하는 내용은 cloning했던 방식인 in-fusion cloning입니다. in-fusion cloning은 제한 효소 사이트가 없어도 쉽게 복제할 수 있는 방법입니다.제한 효소를 이용해서 절단된 선형 플라스미드에 말단과 상보적 말단을 가진 삽입을 PCR을 통해서 제작합니다. 통상의 라이 트러게이 션과 마찬가지로 인퓨전 효소를 갖고 믹스 차와 벡터와 삽입을 넣어 50도에서 15분간 반응시키면 라이 트러게이 션이 일어납니다.이 과정에서 인퓨전 효소가 말단 부분 15bp의 3’부분을 제거하여 단일 고리로 삼아 stikyend를 이용한 라이 트러게이 션과 같이 상보적인 부분과 유이 패함으로써 목적의 유전자를 벡터 내에 넣을 수 있습니다.이런 인퓨전 과정은 15분을 지나서도 효율이 오르지 않아요. 오히려 에러가 나설 확률이 높으므로 적정 시간을 지켜서 주지 않으면 안 되는 것이 일반적인 라이 트러게이 션의 차이입니다. 또 삽입과 벡터가 바뀔 때에 프라이머를 제작해야 하는 번거로움과 비용적 측면에 단점을 갖고 있다. 그래도 편리하고 제한 효소 사이트를 쉽게 쥘 수 있으니 잘 사용하고 있다.
